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用鼠尾膠原蛋白進行膠原收縮測定

發布時間: 2023-11-23  點擊次數: 972次

用鼠尾膠原蛋白進行膠原收縮測定

ACOX3 功能障礙是頸內動脈復發性自發性血管痙攣的潛在原因

使用的先進 BioMatrix 產品:

RatCol® I 型鼠尾膠原蛋白 (4 mg/ml) 和中和溶液(包含在鼠尾膠原蛋白試劑盒中)

產品的使用方式:

我們的膠原蛋白用于形成 3D 水凝膠,并用 HASMC 播種/嵌入。作為膠原蛋白收縮測定的一部分,每 24 小時測量一次膠原蛋白水凝膠。

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文章摘要:

顱外頸內動脈復發性自發性血管痙攣(RSV-eICA)是導致年輕人缺血性卒中的一個鮮為人知的原因。然而,其病理生理學仍然很大程度上未知。通過對受 RSV-eICA 影響的兩個韓國異卵雙胞胎兄弟的 ACOX3 基因進行全外顯子組測序,我們鑒定了兩種復合雜合錯義變異 c.235 T >G (p.F79 V) c.665G>A (p.G222E) )。計算機分析表明,這兩種變體均被歸類為致病性。體外 ACOX3 酶測定表明 F79 V G222E 突變體實際上沒有酶活性。為了確定突變體對血管痙攣的影響,我們對人主動脈平滑肌細胞(HASMC)進行了膠原收縮測定。

Carbachol 是一種膽堿能激動劑,可誘導 HASMC 收縮。使用 siRNA 敲低 HASMC 中的 ACOX3,可顯著抑制由卡巴膽堿引發的 HASMC 收縮。通過編碼siRNA抗性野生型ACOX3的質粒轉染,卡巴膽堿誘導的HASMC收縮得到恢復,但通過ACOX3 G222E轉染或ACOX3 F79VACOX3 G222E共轉染則不能恢復,表明兩種ACOX3突變體抑制卡巴膽堿誘導的HASMC收縮。我們認為 ACOX3 功能障礙會引起基底主動脈肌源張力的長期喪失。結果,頸內動脈中間段的平滑肌(其中交感神經支配特別豐富)變得對擬交感神經刺激(例如劇烈運動)過敏,導致復發性血管痙攣。因此,ACOX3功能障礙可能是RSV-eICA的致病機制。我們第一次報道了 ACOX3 可能參與維持人動脈平滑肌的基礎肌源張力。

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